比色前將各個比色皿中裝入蒸餾水。測定吸光度值時是必須用參比液的。
1、可將波長選擇置實際使用的波長上，將一套比色皿都注入蒸餾水，將其中一只的透射比調至100%處，測量其他各只的透射比，凡透射比之差不大于0.5%，即可配套使用。
2、比色前將各個比色皿中裝入蒸餾水，在比色波長下進行比較，誤差在±0.001吸光度以內的比色皿選出4-8個進行比色測定，可避免因比色皿差異造成測量誤差。
3、若各個皿差別差0.5%，通常不能配套使用。臨時應急可以分別做標記，固定兩只在空白和測量位置使用，千萬別交叉，扣除分別的偏差值作為真正的信號值。在測量吸光度值時的時候，必須要選用參比液，這樣可以減小測量的誤差。選用參比液時，應盡可能地保持一致，但不包含樣本。
參比液是用來調節透射比100%，即將吸光度調為0，然后再測定待測溶液的吸光度。